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博瑞科生物鴨病毒性肝炎篩選與回歸試驗

發布時間:2024-07-15

博瑞科生物

鴨病毒性肝炎篩選與回歸試驗

鴨病毒性肝炎病毒篩選

1.1 分離病毒

從不同地區發病鴨場內解剖感染病例,獲得病毒載量較高的器官--肝臟,經研磨過濾后接種于10日齡鴨胚,鴨胚出現死亡后收獲尿囊液和胚體,經研磨離心過濾后再次接種到10日齡鴨胚,重復以上過程,直至該毒株可使鴨胚穩定死亡。

1.2  純凈性檢測

將篩選到的病毒進行細菌、真菌、支原體及其他常見病毒檢測。

1.3 鴨胚培養與毒價測定

將1.1獲得的胚毒用于檢測病毒毒價,如表1所示。根據所得病毒毒價,將1型毒株分離株1、分離株2、分離株4和3型毒株分離株6、分離株8接種到4日齡雛鴨進行動物回歸實驗。鴨胚半數致死量(ELD50)用Reed-Muench法計算。

1.4 動物回歸實驗

將5個分離株回歸4日齡雛鴨,各10只,每天記錄死亡情況和剖檢觀察肝臟病變,結果見表2,將分離株2、分離株4和分離株6作為疫苗待選毒株。

雛鴨攻毒保護實驗

1、2日齡健康未免疫雛鴨40只,由山東博瑞科生物技術有限責任公司研發部提供。

2、鴨病毒性肝炎精制蛋黃抗體(甘維康),由山東博瑞科生物技術有限責任公司質控部提供。

3、鴨肝炎病毒(1+3)型病毒液,0.2ml含100ID50 ,由山東博瑞科生物技術有限責任公司質控部提供。


雛鴨攻毒保護率檢驗方法:

  1. 把40只2日齡雛鴨,分為1、2、3、4組,每組10只。

  2. 1組為健康對照組,不注射任何藥品,單獨隔離飼養;2、3組為蛋黃抗體免疫組,每組分別肌肉注射0.5羽份、1羽份卵黃抗體;4組為攻毒對照組,每只注射生理鹽水0.5ml,隔離飼養。

隔24小時左右,2、3、4組分別肌肉注射鴨肝炎病毒1+3型病毒液0.2ml,繼續隔離飼養,觀察10天,記錄死亡鴨子只數。

雛鴨攻毒保護率檢驗法按暫行規程要求蛋黃抗體組保護率80%以上 ,對照組死亡數符合要求 ,抗體效價合格 。以上試驗符合試驗要求,兩種免疫劑量的雛鴨攻毒保護率分別為 90%和90%。

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